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夾芯式垂直電泳槽使用方法


放大字體  縮小字體 發布日期:2021-10-05   來源:上海金鵬分析儀器有限   作者:   瀏覽次數:18
 夾芯式垂直電泳槽使用方法:
  夾芯式垂直電泳槽使用方法:
一、組成部件
(一)裝有鉑金絲的貯液槽一對,配有冷卻裝置及電泳緩沖液流出口。 
(二)凹型橡膠框,配有玻璃板,可分別制作厚度為lmm、1.5mm的凝膠板,操作時根據需要選擇適當厚度的玻璃板及梳子配套使用。
(三)樣品孔模具(梳子)用于電泳加樣。 
(四)固定貯液槽的螺絲桿及螺母4對,28D、30型為5對。 
(五)橡膠管五根。兩根長的用于連接冷卻水的出入口;中等長度的兩根用于連接電極緩;中液的流出口;*短的一根用于連接貯液槽間的冷卻水。
(六)導線1付。
● 二、使用方法
(一)清洗部件
上述部件組裝前要徹底清洗干凈。尤其是玻璃板及凹形帶槽橡膠框,必須用泡沫海綿沾少許肥皂粉或洗滌劑徹底清洗干凈。清洗后的玻璃板應放在玻璃板支架上晾干水后方能使用。
(二)組裝電泳槽
A、1、將四只固定螺桿插到一只貯液框(半上槽)的相應孔洞中,然后將貯液框仰放在桌上。
2、左手拿凹型槽橡膠模框,右手的拇指與中指握住玻璃板的兩側邊緣插到橡膠模框內 (注意手指不能接觸灌膠面的玻璃板)。
3、將帶有玻璃的橡膠模框子放在仰放的貯液槽框架上,其下緣必須對齊貯液槽框下緣。
4、雙手拿另一只貯液槽框與仰放在桌上的貯液槽框相合,并使橡膠框上的凸出線位于貯液槽有機玻璃框中央。
5、裝上四只螺母,擰緊螺絲。注意擰緊螺絲時用力應均勻,*好用雙手按斜角位置雙雙逐漸擰緊。
6、將電泳槽垂直豎起,放在桌上,帶短玻璃板的貯液槽稱上槽(陰極端),帶長玻璃板的貯液槽稱為下槽(陽極端),在長玻璃板與橡膠框間有一縫隙。此縫隙可用已熔化的10%瓊脂沿長玻璃板下端灌入,為防止留存氣泡,可稍抬起一端即可趕去氣泡。待瓊脂完全凝固后才能灌膠。
B、也可將槽垂直豎起,將帶有玻璃的橡膠模框直接放入槽中,對稱擰緊螺絲后,用瓊脂封底邊。
(三)灌膠
1、先灌分離膠,待凝固后再灌濃縮膠。灌膠前接通冷卻水,夾緊連接上下貯液槽的兩根橡膠管。
2、用細頭滴管吸取膠液,沿長、短玻璃板中間縫隙從一端加入膠液。為防止產生氣泡,可稍拾起另一端(氣泡往高處走),不斷加入膠液。若單層膠(分離膠)則加膠量約距離短玻璃板上端0.3厘米處,輕輕加少許水,雙手輕輕將梳子插入,待膠凝后就可形成凹形加樣孔。 
3、為防止漏膠,在上、下貯液槽中立即加入蒸餾水,但蒸餾水不能超過短玻璃板上緣。
4、膠凝固后即可看到樣品槽梳子與凝膠板間有一層折
射率不同的亮區。
(四)加樣
1、松開連接上、下貯液槽兩根橡皮管上的夾子,放掉槽內的蒸餾水,待水流完后,再夾緊夾子。
2、雙手輕輕取出樣品梳子,即可看到界線清楚的加樣孔,將孔中水分吸去(注意千萬不要碰壞孔沿的字面)。
3、在上、下貯液槽中加入緩;中液,液體高度應超過上貯液槽短玻璃板上緣。
4、用微量注射器吸取一定量的樣品加到長、短玻璃板間的凹型凝膠樣品孔內(注意加樣動作要輕,針頭不能碰壞膠面)。
(五)電泳
一貯液槽導線與電泳儀的負極相連,下貯液槽導線與電泳儀的正極相連。檢查線路無誤,方可按照所要求的電壓電流進行電泳。
(六)取出膠板
電泳結束,旋松螺母,取出膠框,剝出玻璃板,在兩塊玻璃板下角空隙內,用刀片背面輕輕撬動,即可將膠面與一塊玻璃板分開,將有膠板的玻璃板平放在桌上,雙手輕輕沿凝膠底將膠片托起,放在大培養皿中染色,膠板經漂洗、脫色后即可看到清晰的分離條帶。
以上就是上海金鵬分析儀器有限公司為大家整理總結關于夾芯式垂直電泳槽使用方法。
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